本发明公开一种培养水果实蝇的方法，所述方法包括步骤：(1)将带有疑似虫卵或幼龄幼虫的水果放置于培养箱；箱盖上开设有透气孔，并用网目不大于1mm的纱网进行了粘封，除所述透气孔外，箱体及箱盖其余部分呈密封状态；(2)培养7－16天待幼龄幼虫或卵发育为老熟幼虫。本发明还公开了一种实蝇培养箱，包括箱体及箱盖，箱盖上设有用网目不大于1mm的纱网进行粘封的透气孔，并且除所述透气孔外，箱体及箱盖其余部分呈密封状态。本发明的方法及培养箱，通过在箱盖上设置透气孔，且透气孔选用不大于1mm网目的纱网进行粘封后，一方面有利于放置在培养箱内水果的透气保存，另一方面，有效地防止了水果实蝇幼虫从培养箱中弹跳而出。