本发明提供了一种用于检测动物源性食品中呋喃唑酮代谢物的酶联免疫试剂盒，它含有：包被呋喃唑酮代谢物衍生物抗原的酶联板或包被抗抗体的酶联板，酶标记物，呋喃唑酮代谢物衍生物特异性抗体，呋喃唑酮代谢物衍生物标准品溶液，底物显色液，终止液，浓缩洗涤液，浓缩复溶液。本发明还公开了一种应用这种酶联免疫试剂盒检测呋喃唑酮代谢物的方法，它包括以下步骤：首先进行样品前处理，然后用试剂盒进行检测，最后分析检测结果。本发明提供的检测动物源性食品中呋喃唑酮代谢物残留的酶联免疫试剂盒及方法，样品前处理过程简单，费用低廉，且能同时检测大批样品。