一种脱毒马铃薯试管苗培养基及其制取方法，其培养基基本母液中含有以下物质：硝酸钾、硝酸铵、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯化钙、硫酸锰、碘化钾、硼酸、硫酸锌、钼酸钠、硫酸铜、氯化钴、乙二胺四乙酸二钠、硫酸亚铁、肌醇、甘氨酸、盐酸硫胺素，在基本母液中加入C源、植物生长素、植物细胞分裂素、增稠剂，经过溶解、定容、加热、高温高压灭菌等工艺制取，本发明生产周期短、试管苗生长旺盛、工艺简单、生产率、驯化移栽成活率高，试管苗培养基成流胶状。