本发明公开了一种胆甾－3β，5α，6β，19－四羟基－24－酮及衍生物的合成方法，该方法以猪去氧胆酸为原料，制备3β－乙酰氧基－胆甾－5－烯－24－酸，通过和氯化亚砜反应制备成胆甾酰氯，超声波辐射下和异丙基镉试剂反应得3β－乙酰氧基－胆甾－5－烯－24－酮，再与N－溴代丁二酰亚胺/高氯酸水溶液体系反应得到3β－乙酰氧基－胆甾－5α－溴－6β－羟基－24－酮，之后用二乙酰氧基碘代苯生成3β－乙酰氧基－胆甾－5α－溴－6β，19－环氧－24－酮，用锌粉/冰醋酸体系还原生成3β，19－二乙酰氧基－胆甾－5－烯－24－酮；再用氧化剂氧化5，6位双键，水解反应得胆甾－3β，5α，6β，19－四羟基－24－酮；最后和甲基三苯基溴化膦反应合成24－亚甲基－胆甾－3β，5α，6β，19－四醇；和肼反应合成胆甾－3β，5α，6β，19－四羟基－24－双腙。本发明的合成方法具有原料廉