一种昆虫抗冷冻蛋白基因序列及其表达纯化方法
发明专利申请公布后的驳回
摘要
本发明公开了一种昆虫抗冷冻蛋白基因，其序列为SEQ ID NO：1。本发明还提供了该昆虫抗冷冻蛋白基因的克隆、蛋白表达及纯化方法，主要包括以下步骤：利用特异性引物扩增该昆虫抗冷冻蛋白基因，与原核生物表达元件PTYB11连接构建表达载体PTYB11－afp，转化表达菌株BL21，加入诱导剂诱导，以及纯化抗冷冻蛋白。运用本发明所述的方法成功地克隆到了昆虫抗冷冻蛋白基因。诱导表达的抗冷冻蛋白占菌体总蛋白的30％，通过介质纯化后得到的抗冷冻蛋白纯度达95％以上，说明本发明提供的方法是高效的。而且，用本发明所述的表达系统得到的融合蛋白不需要内切酶即可切除标签蛋白，不含多余的氨基酸序列，更接近天然蛋白活性。
基本信息
专利标题 ：
一种昆虫抗冷冻蛋白基因序列及其表达纯化方法
专利标题（英）：
暂无
公开（公告）号 ：
CN1800393A
申请号 ：
CN200510126417.3
公开（公告）日 ：
2006-07-12
申请日 ：
2005-12-08
授权号 ：
暂无
授权日 ：
暂无
发明人 ：
郭丽琼林俊芳陈小萍
申请人 ：
华南农业大学
申请人地址 ：
510642广东省广州市天河区五山路483号
代理机构 ：
北京路浩知识产权代理有限公司
代理人 ：
向华
优先权 ：
CN200510126417.3
主分类号 ：
C12N15/12
IPC分类号 ：
C12N15/12 C12N15/09 C12N15/10 C12N1/21 C07K1/14
IPC结构图谱
C
C部——化学；冶金
C12
生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程
C12N
微生物或酶；其组合物；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基。
C12N15/00
突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体或其分离、制备或纯化；所使用的宿主
C12N15/09
DNA重组技术
C12N15/11
DNA或RNA片段；其修饰形成
C12N15/12
编码动物蛋白质的基因
法律状态
2008-11-26 ：
发明专利申请公布后的驳回
2006-09-06 ：
实质审查的生效
2006-07-12 ：
公开
注：本法律状态信息仅供参考，即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
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