本发明公开了四逆散水煎液的HPLC标准指纹图谱的建立方法及由该方法建立的指纹图谱，属于中药领域。该方法包括以下步骤：1)取四逆散水煎液粉末，加入甲醇超声提取，过滤，滤液用甲醇定容，溶液过微孔滤膜，得标准品溶液；2)取柚皮苷适量，用流动相稀释，制成对照品溶液；3)分别精密吸取标准品溶液和对照品溶液，分别注入高效液相色谱柱，以对照品色谱峰的保留时间和峰面积积分值为1，计算标准品相对保留时间和相对峰面积，制定得到标准指纹图谱。本发明方法所建立的标准指纹图谱可用于四逆散水煎液所含成分的定性及定量分析，而且也为四逆散水煎液给药后血清中成分的分析奠定了基础。