本发明提供的是一种生物降解除草剂氯嘧磺隆菌剂的制备方法。取田间多年施用氯嘧磺隆的土壤为处理对象，用无菌生理盐水溶解后制得土壤悬浊液；在蛋白胨培养基中添加氯嘧磺隆的浓度为100mg/L，该培养基在121℃、20分钟灭菌冷却后，接种土壤悬浊液，接种量10％，在30℃下摇瓶培养5天，将培养液按10％接种量接种于氯嘧磺隆的浓度为200mg/L的蛋白胨培养基中，然后在30℃下摇瓶培养5天，依次类推10次接种，按氯嘧磺隆100mg/L的浓度梯度增长，使最终蛋白胨培养基的氯嘧磺隆的浓度在接种前达1000mg/L，得到富集降解菌株培养物种子；富集降解菌株培养物种子经过斜面培养、一级扩大培养、二级扩大培养后加入降解菌株培养基在28℃温度下发酵36－40小时经包装制成产品。