本发明公开一种苯巴比妥快速检测试纸条。它含有底层为支撑层，中间层为吸附层，保护层固定在吸附层上，吸附层从测试端依次为测试端吸附纤维层、吸附金标抗体纤维层、纤维素膜层及手柄端的吸水材料层，其中在纤维素膜层上有用偶联苯巴比妥的载体蛋白溶液印制的直线式检测印迹，用羊抗或兔抗小鼠IgG或羊抗兔IgG抗体溶液印制的直线式对照印迹。苯巴比妥金标抗体为胶体金标记的苯巴比妥单克隆抗体或多克隆抗体，偶联苯巴比妥的载体蛋白溶液为苯巴比妥与载体蛋白偶联的复合物溶液。偶联苯巴比妥的载体蛋白为牛血清白蛋白，或鸡卵清白蛋白，或为匙孔血蓝蛋白。本发明的试纸条具有特异性强，灵敏度高，简便，直观，准确，适用范围广，成本低，易于推广应用。