大片段海绵宏基因组DNA快速提取方法

专利权的终止

摘要

一种大片段海绵宏基因组DNA快速提取方法，无菌条件下用无钙镁人工海水浸泡海绵样品并撕成1－3mm³小块，浸泡使海绵细胞及其共附生微生物分散于溶液中，静置、吸取上层混合细胞悬浮液，加入乙二胺四乙酸、十二烷基肌氨酸钠组成的碱性破壁缓冲液和含Ca²⁺的蛋白酶K溶液消化细胞壁，采用Tris－饱和酚、氯仿、异戊醇混合溶液以及氯仿、异戊醇混合溶液提取DNA，再加入醋酸钠及异丙醇得到DNA沉淀，70－75％乙醇洗涤、干燥、溶于TE缓冲液，采用RNase酶消解RNA，琼脂糖凝胶电泳检测DNA。本发明简单快捷，适合大于40000个碱基以上的海绵宏基因组DNA提取，可满足宏基因组文库构建和功能基因筛选的需要。

基本信息

专利标题：

大片段海绵宏基因组DNA快速提取方法

专利标题（英）：

暂无

公开（公告）号：

CN1821402A

申请号：

CN200610024278.8

公开（公告）日：

2006-08-23

申请日：

2006-03-02

授权号：

暂无

授权日：

暂无

发明人：

李志勇吴杰

申请人：

上海交通大学

申请人地址：

200240上海市闵行区东川路800号

代理机构：

上海交达专利事务所

代理人：

毛翠莹

优先权：

CN200610024278.8

主分类号：

C12N15/10

IPC分类号：

C12N15/10 C12N15/12