本发明公开了一种用高效液相色谱和质谱联用快速筛选血管紧张素转化酶抑制剂的方法。以马尿酸双甘肽或马尿酸组氨酸亮氨酸为底物，以纯化的兔肺血管紧张素转化酶或者非乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝的人血浆为血管紧张素转化酶的来源。本方法较普通的分光光度法或者高效液相色谱法简单、快速、高效。单个样品的总检测时间或者血浆样品的血管紧张素转化酶活力的分析时间不到原有方法的二分之一。可适用于快速分析天然产物提取物、单体以及上市的血管紧张素转化酶抑制剂在体外对血管紧张素转化酶的抑制情况，而且可用于人血浆中血管紧张素转化酶活力的快速分析。