本发明涉及一种用于诊断高危型人类乳头状病毒(HPV)感染的聚合酶链式反应(PCR)荧光检测方法，以及利用该方法制成的试剂盒检测患者体内分离出的DNA样品中HPV基因型以诊断一组高危型HPV感染。属于生命科学和生物技术领域。本发明的试剂盒包括一个以荧光定量PCR技术为基础的多重聚合酶链式反应(PCR)，包含针对多种HPV型的正向引物、反向引物和荧光探针，在适合的PCR条件下可在一个反应管中同时检测HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、67、68、69、73、82等18种HPV型的DNA。由于本发明的试剂盒可以简便快速地在临床样品中诊断HPV感染，准确地检测鉴别高危型HPV的基因型，所以本发明的基因型试剂盒可应用于子宫颈癌的早期诊断。