流式细胞术细胞因子检测法检测乙肝病毒特异性T细胞的方法，属于免疫学分析检测技术领域。本发明运用流式细胞术细胞因子检测法对全血进行检测，在有细胞因子封闭剂布雷菲德菌素A的环境下，在全血中加刺激抗原和协同刺激剂进行抗原刺激，刺激六小时后洗涤，识别淋巴细胞并裂解红细胞。随后进行洗涤和破膜。最后使用荧光标记抗体对细胞内细胞因子进行荧光标记染色，完成后上流式细胞仪分析。本发明建立新型免疫分析技术，用于HBV特异性CTL的检测，明显优于51Cr测定法、有限稀释法(LAD)、MHC－四聚体(二聚体)法，本发明方法不仅灵敏度高，检测对象不受限制，成本低，还能直接检测特异性CTL的功能性细胞因子的表达，可广泛用于临床检测。