转聚磷激酶基因的大肠杆菌的构建方法

专利权的终止

摘要

本发明公开了一种转聚磷激酶基因的大肠杆菌的构建方法，该方法包括基因的克隆和载体的构建；克隆包括：提取大肠杆菌的总DNA；设计引物，扩增ppk基因；扩增出的目的基因重组到克隆载体pMD18－T中；转化大肠杆菌DH5α；构建包括：采用限制性内切酶BamHI和HindIII双酶切带有ppk目的基因的pMD18－T质粒和空表达载体pET－28a(+)；将目的基因通过T4连接酶定向连接到表达载体pET－28a(+)中，然后转化DH5α；利用PCR和双酶切的方法筛选鉴定出阳性重组子；提取出重组质粒pET28a－PPK，转化受体菌株BL21(DE3)中。本发明工艺简单，所得基因菌具有高效的去除磷的能力。

基本信息

专利标题：

转聚磷激酶基因的大肠杆菌的构建方法

专利标题（英）：

暂无

公开（公告）号：

CN1876809A

申请号：

CN200610038917.6

公开（公告）日：

2006-12-13

申请日：

2006-03-17

授权号：

暂无

授权日：

暂无

发明人：

杨柳燕王勤赵庆顺肖琳蒋丽娟尹大强任晶

申请人：

南京大学

申请人地址：

210002江苏省南京市汉中路22号南大环境学院

代理机构：

南京苏高专利事务所

代理人：

柏尚春

优先权：

CN200610038917.6

主分类号：

C12N1/21

IPC分类号：

C12N1/21 C12N15/52 C12N15/70 C12N15/66 C12R1/19