本发明涉及一种生物人工肝中生物反应器制备方法。本发明采用将干细胞培养扩增至1×10⁷数量级，消化、离心浓集后加入扩增型培养液中混悬均匀，再加入到中空纤维滤器中，放入培养箱培养，使其继续扩增，再换成诱导型培养液继续培养，干细胞成为具有肝细胞功能的细胞。解决了过去生物反应器中生物反应细胞种类均限于同种或异种的肝细胞或变异肝细胞的来源稀缺、排斥强烈、活性低且可能存在动物源性感染，以及致瘤性等缺陷。本发明干细胞来源稳定，在中空纤维滤器的极大表面积有得干细胞生长扩增，节约成本，可成为组合型生物人工肝，免疫源性极低或完全免疫相容，排斥反应小，细胞保持活性时间长，保证治疗持续进行，有利于提高治疗效果。