本发明公开了一种乳粉蛋白质含量检测试剂盒，该试剂盒包括乳粉蛋白质含量标准比色卡、取样器、透明刻度容器和双缩脲显色液。本发明还公开了该试剂盒的制造方法，其中包括一个制造乳粉蛋白质含量标准比色卡的步骤，该步骤包括：用已知蛋白质含量的乳粉和标准蛋白质试剂配制含有乳粉的标准蛋白质溶液系列；向上述系列标准蛋白质溶液中加入双缩脲试剂获得混合溶液；对混合溶液拍照；和用图像处理软件处理照片，得到色带并输出。该试剂盒装备简单，便于携带。用于检测乳粉蛋白质含量时不需其它辅助仪器和设备，检测成本低，检测时间短。其检测方法操作简便，对检测人员没有特殊要求。为商品检验人员对乳粉市场进行广泛、经常的监测和进行现场执法提供了可能。