本发明提供靶向间皮素的嵌合抗原受体修饰T细胞及其用途。具体而言，本发明提供的嵌合抗原受体从N端到C端依次含有膜蛋白信号肽、抗间皮素近膜端单链抗体、长50个氨基酸残基以上的铰链区、跨膜区、共刺激信号分子胞内结构域和免疫受体酪氨酸活化基序。本发明还包括表达本文所述嵌合抗原受体的T细胞，该T细胞可以特异性杀伤间皮素高表达的肿瘤细胞株，且对不表达的肿瘤细胞株杀伤作用较小或无，具有很好的特异性。