本发明涉及一种均相免疫检测方法，其包括至少两个检测区域，在一个检测区域判断是否存在由供体‑待检抗体‑受体所形成的第一复合物，而在另一个检测区域判断是否存在由供体‑待检抗原‑受体所形成的第二复合物；其中，所述供体能够在激发状态下生成单线态氧，所述受体能与单线态氧反应产生可检测的信号。该方法解决了抗原抗体一步法检测中的高浓度样本HOOK效应问题和低浓度样本检测灵敏度偏低问题。同时该方法也解决了抗原抗体联合检测时不能区分阳性结果是抗体阳性或抗原阳性的问题。本发明所述方法特别适用于HIV抗原和抗体的联合检测中。