本发明公开了一种红豆杉细胞组织培养物的培养方法，具体地，将红豆杉种子用灭菌、清洗、浸泡、去种皮，接种在诱导培养基上，进行暗培养，待种子出芽后，培养成红豆杉植株；选取生长良好的红豆杉植株作为外植体；将外植体接种于培养基上，暗培养；之后转移至温度为25℃及28℃的培养室培养；选取生长旺盛、无褐变、黄白色特征的愈伤组织接种到继代培养基进行周期性的继代培养；之后，选取种子，将种子接种到继代培养基中，光培养，培养30～35天后收集，红豆杉细胞组织培养物。本发明提供的红豆杉细胞组织培养物其紫杉醇含量可以达到15‰‑17‰，并且红豆杉细胞组织在传代的过程中不褐化，产生紫杉醇的含量不降低，改变温度、光照等条件依然可以稳定生长。