本发明涉及兔出血症病毒杆状病毒载体、多杀性巴氏杆菌病二联灭活疫苗及其制备方法，属于免疫技术领域。将重组兔出血症病毒VP60杆状病毒接种Sf9昆虫细胞，于27～28℃培养，待细胞病变达85%以上时，收获细胞培养物并灭活，以灭活物作为兔出血症病毒抗原；将兔源荚膜A群多杀性巴氏杆菌C51‑17菌株扩增培养，将菌液进行灭活，以灭活菌液作为多杀性巴氏杆菌抗原；将两种抗原与佐剂按比例混合制成兔出血症病毒杆状病毒载体、多杀性巴氏杆菌病二联灭活疫苗。本发明可以提供一种安全性高、免疫效果好、工艺简便的兔出血症病毒杆状病毒载体、多杀性巴氏杆菌病二联灭活疫苗，用于预防控制兔病毒性出血症（兔瘟）和兔多杀性巴氏杆菌病。