鲤浮肿病毒和锦鲤疱疹病毒双重实时荧光定量检测方法
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摘要
本发明公开了一种鲤浮肿病毒和锦鲤疱疹病毒双重实时荧光定量PCR检测方法，该方法包括以下步骤：第一、合成引物与TaqMan探针：根据CEV P4a基因序列，对引物序列进行优化，上游引物第1个碱基改为简并碱基W，下游引物第1个碱基改为简并碱基R；根据KHV ORF7基因保守序列，设计1对特异性引物和1条TaqMan探针；分别使用FAM和VIC作为探针报告基团，BHQ1作为探针淬灭基团；第二、确定反应体系及条件：采用20μL反应体系，2×Probe PCR Master Mix 10μL，上、下游引物和探针引物终浓度在0.2μmol/L～0.8μmol/L之间，QN ROX参考染料0.1μL，模板2.5μL，DEPC水补足20μL；反应程序为：95℃预变性2min，1个循环；95℃5s，50～60℃退火31s，40个循环。
基本信息
专利标题 ：
鲤浮肿病毒和锦鲤疱疹病毒双重实时荧光定量检测方法
专利标题（英）：
暂无
公开（公告）号 ：
CN109897918A
申请号 ：
CN201910275066.4
公开（公告）日 ：
2019-06-18
申请日 ：
2019-04-08
授权号 ：
CN109897918B
授权日 ：
2022-06-07
发明人 ：
张文徐立蒲吕晓楠
申请人 ：
北京市水产技术推广站
申请人地址 ：
北京市大兴区北京经济开发区科创十四街99号1幢
代理机构 ：
天津合正知识产权代理有限公司
代理人 ：
吕琦
优先权 ：
CN201910275066.4
主分类号 ：
C12Q1/70
IPC分类号 ：
C12Q1/70 C12Q1/686 C12N15/11
相关图片
IPC结构图谱
C
C部——化学；冶金
C12
生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程
C12Q
包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法；其所用的组合物或试纸；这种组合物的制备方法；在微生物学方法或酶学方法中的条件反应控制
C12Q1/64
•地质微生物试验，如用于石油
C12Q1/70
包括病毒或噬菌体
法律状态
2022-06-07 ：
授权
2019-07-12 ：
实质审查的生效
IPC(主分类) : C12Q 1/70
申请日 : 20190408
申请日 : 20190408
2019-06-18 ：
公开
注：本法律状态信息仅供参考，即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
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1、
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