本发明属于病理组织取材辅助装置技术领域，尤其涉及一种一次性术中冰冻病理组织收集取材装置及其应用。所述装置包括：底板，固定架，滚轴，柔性膜，捆绑部件，冻融区,烘干区，组织放置槽，插槽，出水管等；所述底板的一端设置有两组固定架，滚轴设置在两组固定架之间，且滚轴能够以固定架为支点进行转动；柔性膜卷绕在滚轴上；捆绑部件设置在底板上；底板的另一端为冻融区和烘干区，其中设置有加热装置；冻融区设置有组织放置槽；烘干区设置有插槽；出水管和组织化冻槽连通。本发明的装置具有可靠，高效和使用方便的特点，能够很好地解决现有术中快速冰冻病理取材和收集标本和冻融时效性和准确性这一临床病理问题。