本发明公开了一种确定厌氧颗粒污泥最适保存温度的方法，属于环境工程技术领域。本发明方法利用流式细胞术测定不同温度保存的厌氧颗粒污泥的细胞活性状态，将其中细胞活性状态最接近厌氧颗粒污泥中试运行时的细胞活性状态的保存温度确定为最适保存温度，测试数据经活性恢复后细胞活性状态和性能效果验证可靠。本发明方法可以省略厌氧颗粒污泥活性恢复的步骤，有效帮助准备采用厌氧颗粒污泥技术的高浓度有机废水处理工艺缩短高效生产甲烷时间，且产甲烷浓度和甲烷产量均分别超过34％和70ml；既可维持厌氧颗粒污泥工艺长期稳定运行，又能够保持较好的活性，具有很高的可行性。