本发明提供一种基于荧光素酶互补的生物传感器，包括荧光素酶氨基端片段和荧光素酶羧基端片段，荧光素酶氨基端片段的氨基端和荧光素酶羧基端片段的羧基端中的其中一个与G蛋白连接，另一个与第一标记物连接，荧光素酶氨基端片段和荧光素酶羧基端片段为同一荧光素酶的两个互补片段；连接有第二标记物的待测物抗原，第二标记物与第一标记物互补；待测物抗体；以及荧光素酶底物。通过利用荧光素酶氨基端片段和羧基端片段互补、第一标记物和第二标记物互补、待测物/待测物抗原和待测物抗体互补以及G蛋白和待测物抗体互补的四元互补体系，实现对待测物的快速检测，检测灵敏度高、特异性强、背景噪音小，可用于复杂样品中待测物的定量分析。