本实用新型公开一种微孔板加样定位装置，包括：支架、第一定位板、第二定位板；所述支架呈盒形，顶面与一侧面不设挡板封闭，所述支架包括底板、第一挡板、第二挡板、与所述第二挡板面积相同且位置相对的第三挡板；所述第一挡板开设第一卡槽，所述第一定位板移动得贯穿于所述第一卡槽；所述第二挡板开设第二卡槽，所述第三挡板在与所述第二挡板的第二卡槽相对的位置开设同样的第二卡槽，所述第二定位板移动得贯穿于所述第二挡板、第三挡板的第二卡槽。本实用新型通过随加样操作移动第一定位板与第二定位板以达到定位的效果，以解决加样时易发生的漏加、错加或重复加样的情况，降低实验人员的加样难度，提高加样准确率，提高工作效率。