本实用新型公开了一种高通量肿瘤细胞三维培养及药物筛选试剂盒，具体涉及试剂盒领域，包括试剂盒本体，所述试剂盒本体顶部设有第一存放槽，所述第一存放槽一侧设有第二存放槽，所述第一存放槽一端设有固定槽，所述第一存放槽内部设有培养板，所述第二存放槽内部设有试剂瓶，所述固定槽内部设有试剂管，所述试剂瓶和试剂管外壁均设有标签纸，所述第一存放槽内还设有铝塑袋。本实用新型通过设有培养板和铝塑袋，使用者可在4℃和‑20℃环境下分别采用培养板和铝塑袋对培养液进行保存时，第二存放槽可以储存方形大试剂瓶，多个固定槽用于存储多根试剂管，高通量、稳定、均匀、可控地生成肿瘤微球。