本实用新型公开了一种玉米育种使用的抗病性鉴定装置，包括培养管、操作罐和喷洒罐，培养管的下侧设有操作罐，操作罐的下侧安装喷洒罐，将培养管上的环形滑块卡嵌进操作罐的环形轨道中，将喷洒罐焊接在操作罐的底部，在培养管中上设置上培养皿，上培养皿与操作罐中的下培养皿合并，并在上培养皿的培养基质中培养玉米幼苗，使玉米幼苗的根部生长到下培养皿的培养基质中，上移培养管，使上培养皿与下培养皿分离并将根部暴露出来，打开操作罐上的侧门板，对根部进行伤根操作，伤根完毕后关闭侧门板，利用下侧的喷洒罐向上喷洒病原菌，对玉米幼苗的伤根处进行病毒接种，并继续进行后续培养监测，实验操作简便，实验效率较高。