本实用新型涉及生物检测技术领域，尤其是涉及一种核酸提取、扩增及检测一体试剂卡。核酸提取、扩增及检测一体试剂卡包括试剂卡主体及设在试剂卡主体上的液体包组件、样品放置区、驱动组件、核酸提取区、核酸扩增区、核酸检测区和微通道系统；样品管安装在样品放置区，样品放置区还设有用于刺破样品管的刺破组件；微通道系统将驱动组件与核酸提取区、核酸扩增区和核酸检测区连通，并且在驱动组件与核酸提取区、核酸扩增区和核酸检测区之间的各个微通道上均设有阀门，以使驱动组件能够与核酸提取区、核酸扩增区和核酸检测区中的任意一个单独连通。缓解现有技术中存在的核酸提取、扩增及检测三个步骤独立操作繁琐复杂，易受到污染的技术问题。