本实用新型涉及一种检测黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素的检测卡，检测卡包括试纸条，试纸条包括反应膜、设置在反应膜的一端上的结合垫及设置在结合垫上的样品垫，反应膜上沿反应膜的长度方向依次分布有用于检测黄曲霉毒素B1的第一检测线、用于检测玉米赤霉烯酮的第二检测线、用于检测呕吐毒素的第三检测线和质控线，结合垫上包被有UCP标记的三种霉菌毒素单克隆抗体。该检测卡将检测黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素三种霉菌毒素的检测线设置在同一张反应膜上，大大简化检测卡的结构设计及检测卡小型化。且检测卡采用UCP标记，敏感性高，稳定性好，无生物体荧光干扰，还能同时定量检测待测样本中的三种霉菌毒素的残留。