本实用新型公开了一种防污染结核菌培养管，包括培养内管、管盖和密封桩，所述培养内管的外表面固定有外管，且外管的上表面设置有入料管，所述培养内管的内部固定有隔离板，所述管盖安装于入料管的上方，且管盖的侧表面固定有把手，所述管盖的内表面贴合有密封垫，且密封垫的下方安装有堵塞桩，所述密封桩安装于隔离板的内侧，且密封桩的下端面固定有螺杆。该防污染结核菌培养管的主要特点是培养内管采用横向设计，使得培养内管内部的营养液可以较为均匀的分布，不会存在营养液过度堆积和营养液稀疏的情况，隔离板将培养内管等分为两组，进而实现一根培养管进行多组实验，方便进行实验对比，且具有较为全面的防外界细菌污染的结构。