本实用新型公开了一种手机玻璃二次定位夹具，包括操作台和提拉装置，所述操作台的上端开设有凹槽，所述凹槽的内腔左右两端均固定安装有固定块，两个所述固定块的相对一端均开设有T型滑槽，两个所述T型滑槽内均活动连接有滑块，两个所述T型滑槽的内腔底端均固定安装有弹簧，两个所述弹簧的上端分别与两个滑块的下端固定连接，两个所述固定块的相对一端均固定安装有支撑板。本实用新型通过将手机玻璃置于四个密封橡胶垫上，然后通过支撑板对手机玻璃进行支撑，然后启动抽风机从而将立柱内的气体和密封橡胶垫内的气体排出，从而立柱内产生负压对手机玻璃进行吸附从而将手机玻璃牢固的定位在立柱上，进一步的提高了手机玻璃定位的精度。