本实用新型公开了一种细菌定量取样盒，包括取样盒，所述取样盒的内部设置有泡沫保护层，所述泡沫保护层的上表面分别开设有试管槽、试管底圆槽、固定板槽、取样棒槽和取样卡槽，所述固定板槽的上表面放置有与之相适配的固定板，所述固定板的上表面套设有多根取样试管，所述固定板的两侧均固定连接有旋转轴。该细菌定量取样盒，通过设置取样卡上取样孔的大小和规格形成一定的面积，根据面积可以放置定量的细菌，从而达到了细菌可定量取样的效果，在取样的过程中，利用取样棒向取样试管内蘸取少量的细菌，然后将取样棒上的细菌铺放至取样孔上，在取样之前取样棒和取样卡都经过酒精灯高温消毒，从而达到了方便提取细菌的效果。