本发明涉及防腐技术领域，公开了一种含马齿苋提取物的组合物及其制备方法与应用，该组合物含有肉桂树皮提取物、茴香提取物、厚朴树皮提取物和马齿苋提取物，相对于100重量份的肉桂树皮提取物，茴香提取物的含量为20‑100重量份，厚朴树皮提取物的含量为5‑10重量份，马齿苋提取物的含量为10‑60重量份，并辅以特定重量份的低级醇、非离子表面活性剂和水，得到具有优异抑菌效果的组合物，且为油溶性，适合用于含乳化剂的产品中，并且对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单孢杆菌、白色念珠菌和黑曲霉具有较低的抑菌MIC值，且刺激性降低，对产品颜色无影响，对上述五种菌防腐挑战均可通过。