一种提高脯氨酰内肽酶催化效率的分子改造设计方法
授权
摘要
本发明改造脯氨酰内肽酶以提升其催化效率的理性设计方法主要是通过同源建模获得嗜热球杆菌(Sphaerobacter thermophiles)脯氨酰内肽酶，分子对接获得酶‑底物复合物结构，MD模拟使结构稳定，对底物附近的酶残基进行虚拟饱和突变，约束性MD模拟使酶处于完美催化的“近进攻态”构象，利用MM/GBSA方法计算结合自由能从而虚拟筛选出潜在催化效率提升的突变体酶。通过大肠杆菌表达系统进行酶的表达，镍柱纯化，使用HPLC测定重组酶对于九肽底物的酶活及动力学参数。结果表明，本发明分子改造设计方法可以快速有效提升脯氨酰内肽酶的催化活性，说明本发明的酶改造方法可靠。
基本信息
专利标题 ：
一种提高脯氨酰内肽酶催化效率的分子改造设计方法
专利标题（英）：
暂无
公开（公告）号 ：
CN111540404A
申请号 ：
CN202010300809.1
公开（公告）日 ：
2020-08-14
申请日 ：
2020-04-16
授权号 ：
CN111540404B
授权日 ：
2022-04-22
发明人 ：
李晓琳韩艳芳张鲁嘉张增辉丛亚龙马明哲方波欢
申请人 ：
华东师范大学
申请人地址 ：
上海市普陀区中山北路3663号
代理机构 ：
上海湾谷知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人 ：
倪继祖
优先权 ：
CN202010300809.1
主分类号 ：
G16B5/00
IPC分类号 ：
G16B5/00 G16B15/30 G16B30/10 G16B50/30
IPC结构图谱
G
G部——物理
G16
特别适用于特定应用领域的信息通信技术
G16B
生物信息学，例如特别适用于计算分子生物学中的遗传或蛋白质相关数据处理的信息与通信技术
G16B5/00
特别适用于生物系统的建模或仿真，例如遗传基因管理网络、蛋白质交互作用网络或新陈代谢作用网络的ICT
法律状态
2022-04-22 ：
授权
2020-09-08 ：
实质审查的生效
IPC(主分类) : G16B 5/00
申请日 : 20200416
申请日 : 20200416
2020-08-14 ：
公开
注：本法律状态信息仅供参考，即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
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