本发明涉及干细胞领域的技术领域，尤其是涉及一种人脂肪间充质干细胞超低温冻存后的复苏方法，本发明采用含有芍药苷的条件培养基，以及使用血清替代物替代了胎牛血清，且在溶液A中添加了一定含量的地黄低聚糖，整个培养体系没有引入动物源成分，同时在人脂肪间充质干细胞的复苏、传代培养以及分泌因子的获取过程中，提高了复苏后人脂肪间充质干细胞的数量和活率，加快了细胞的快速扩增，且传代培养时各代次的人脂肪间充质干细胞活率都较高且十分稳定，便于进行传代培养后续的相关实验，同时增大了分泌因子的获取量，具有良好的临床应用前景。