本发明公开了一种抗人间充质干细胞衰老及增强其干性特征的方法，该方法通过人外周血中的免疫细胞与老化的人间充质干细胞以细胞与细胞接触的方式培养，可显著逆转老化人间充质干细胞的衰老特征，包括减少β半乳糖苷酶、P21和P16蛋白等细胞衰老标志物的表达，同时可明显调节老化人间充质干细胞的细胞周期，具体表现为减少处于G1期细胞数量，增加S期细胞数量。更重要的是，该方法可显著增强老化人间充质干细胞的干性特征，如自我更新能力，增殖能力和多向分化潜能，且该培养方式所获得的细胞用于治疗疾病模型，安全有效。本发明可直接应用到人间充质干细胞长期体外扩增，解决扩增过程细胞老化问题，恢复细胞活力，提高临床应用效果。