本发明涉及一种甾体中间体的制备方法，属于生物制药技术领域。本发明先制备中间体A的甾体混悬液，然后投入含有霉菌种子的发酵培养基中，所述中间体A在霉菌的作用下发生C₁₁位α羟化反应，在转化阶段对发酵液的pH值进行控制，并在发酵后期补加种子液，得到中间体C。本发明提供的技术方案，在转化过程中，增加了控制pH值和后期补种两个技术手段，使得底物中间体A基本消耗殆尽，转化更为彻底，副产物占比可控制在0.7％以下，大幅提高反应效率，解决了甾体中间体转化率低、副产物占比高的问题。