本发明涉及一种使用天然木质素和丙稀酰胺制备两性有机抗分散剂的方法。将木质素高聚物上的酚羟基氧化成羧基，丙稀酰胺与甲醛、二甲胺反应得N，N’‑二甲基亚甲基丙烯酰胺。复合链引发剂引发下，羧基化木质素高聚物与N，N’‑二甲基亚甲基丙烯酰胺接枝共聚，制备出羧基化木质素高聚物‑胺甲基化丙稀酰胺共聚型两性有机抗分散剂。本发明使用木质素高聚物制备有机抗分散剂，降低了丙稀酰胺使用量和生产成本；掺两性有机抗分散剂混凝土具有比掺加聚丙稀酰胺混凝土更佳流动性能，更长凝结时间，更高抗水分散能力，水上、水下抗压强度和水下/水上抗压强度比。此种羧基化木质素高聚物‑胺甲基化丙稀酰胺共聚型两性有机抗分散剂有广阔的应用前景。