一种鸽嗉囊成纤维细胞的分离及原代培养方法
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摘要
本发明提供了一种鸽嗉囊成纤维细胞分离及原代培养方法，包含以下步骤：取胚胎期鸽嗉囊组织，清洗后，将嗉囊组织剪成1mm3大小，均匀平铺细胞培养皿底部，加入少量FBS，置于细胞培养箱中6～8h后取出，加入完全培养基，继续培养，之后每隔2～3d更换一次培养基，培养5～7d即得到汇合度80％～90％的原代细胞。传代时使用提前预热至37℃的PBS清洗原代细胞后，加入胰蛋白酶消化，待细胞在显微镜下皱缩变圆时，加入完全培养基，终止消化，使用移液枪轻轻吹打细胞，转移至15ml离心管中，离心。重新加入完全培养基重悬细胞，按照1:2比例传代培养，置于细胞培养箱中进行培养，定时更换培养基。本发明所述原代分离方法操作简单，获得的细胞量大、纯度高，能够后续稳定培养。
基本信息
专利标题 ：
一种鸽嗉囊成纤维细胞的分离及原代培养方法
专利标题（英）：
暂无
公开（公告）号 ：
CN112391337A
申请号 ：
CN202011381537.9
公开（公告）日 ：
2021-02-23
申请日 ：
2020-11-30
授权号 ：
CN112391337B
授权日 ：
2022-04-12
发明人 ：
陈继兰葛平壮麻慧孙研研李云雷袁经纬倪爱心王攀林边世雄
申请人 ：
中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
申请人地址 ：
北京市海淀区圆明园西路2号
代理机构 ：
苏州言思嘉信专利代理事务所(普通合伙)
代理人 ：
刘巍
优先权 ：
CN202011381537.9
主分类号 ：
C12N5/073
IPC分类号 ：
C12N5/073 C12N5/077
IPC结构图谱
C
C部——化学；冶金
C12
生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程
C12N
微生物或酶；其组合物；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基。
C12N5/00
未分化的人类、动物或植物细胞，如细胞系；组织；它们的培养或维持；其培养基
C12N5/07
动物细胞或组织
C12N5/071
脊椎动物细胞或组织，例如人类细胞或组织
C12N5/073
胚胎细胞或组织；胎儿细胞或组织
法律状态
2022-04-12 ：
授权
2021-03-12 ：
实质审查的生效
IPC(主分类) : C12N 5/073
申请日 : 20201130
申请日 : 20201130
2021-02-23 ：
公开
注：本法律状态信息仅供参考，即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
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