本发明公开了一种可催化石油中烷烃分子产长链脂肪酸的微生物的鉴定方法，包括如下步骤：将微生物投入含有石油和曲拉通的初始催化反应液中，震荡一段时间，得到最终催化反应液，吸取部分的最终催化反应液到另一容器中，再按比例加入铜胺溶液和长链脂肪酸萃取剂溶液，震荡混合得混合液，离心可使混合液分层和澄清，吸取最上层溶液到另一容器中，加入显色剂后即可显红色，红色越浓说明最终催化反应液的脂肪酸类物质越浓，可用于催化石油中烷烃类分子产长链脂肪酸微生物的鉴定。本发明所述的鉴定方法可以快速筛选出能够催化石油长碳链产生羧基的微生物，该方法简单、直观、花费低，可同时处理多个样品。