本发明公开了一种蜂毒真伪快速鉴别及其掺伪量测定的方法，包括以下步骤：蜂毒真伪的快速鉴别和蜂毒掺伪量的测定，其中，所述蜂毒真伪的快速鉴别包括样品预处理；电泳；水浴、染色、脱色；根据样品的条带数、位置以及其深浅判断蜂毒真伪；所述蜂毒掺伪量的测定包括建立掺伪量模型和测定掺伪量。本发明能够简单、准确、直接地鉴别蜂毒真伪，只需微量的用量即可检测，并且灵敏度高，稳定性好；通过利用回归分析方法，建立掺伪蜂毒的最佳检测函数，弥补了本发明的真伪判定方法中无法判断是否以糖掺伪，以多肽掺伪的短板，且具有很好线性关系，能准确反映出其掺伪量。本发明提供的模型可以反复利用，利于下一次的快速检测。