本实用新型公开了一种河道水质检测分层取样装置，包括呈空心状的基座，基座的外壁通过支撑柱安装有不少于三个的取样杯，取样杯的上方设置有遮挡机构，遮挡机构包括杯盖、密封圈、滑座和连杆，连杆通过紧固机构安装在基座上，紧固机构包括固定座、伸缩弹簧、伸缩导向柱、连接板、推拉杆和拉环，连接板通过伸缩弹簧和伸缩导向柱安装在固定座的内壁上，连接板还安装在连杆上，连接板上安装有对称分布的推拉杆，推拉杆的一端穿过固定座延伸至固定座的外侧连接有拉环。本实用新型的河道水质检测分层取样装置，通过不少于三个的取样杯可对河道进行分层取样，解决了现有技术中河道水质检测的取样装置不能同时分层取样的难题，给使用带来便利。