本实用新型公开了一种细胞培养板辅助加样装置。所述细胞培养板辅助加样装置包括：底座、顶框和连接件，底座的顶部开设有用于容纳细胞培养板的凹槽，凹槽的外周设置有外沿，顶框包括依次连接的第一边、第二边、第三边和第四边，第一边和第三边为顶框上相对布置的两条边，顶框对应布置在外沿上，且顶框与外沿通过连接件可拆卸连接，第一边的顶面上对应每行细胞培养板的培养孔的位置均设置有不同的行号，第四边的顶面上对应每列培养孔的位置均设置有不同的列号。该细胞培养板辅助加样装置，依据加样顺序，将定位柱的一端穿过第一安装通孔并置于第一安装孔内，利用定位柱将顶框围成的方框分隔成一个较小的区域，从而将操作者的工作视野缩小。