本实用新型公开一种负压帐篷式生物安全二级实验室，涉及生物安全防护领域，包括对接密封设置的第一帐篷和第二帐篷，第一帐篷包括水平设置的矩形气柱，矩形气柱上连接有竖直设置的多个多边拱形气柱，矩形气柱和多边拱形气柱上通过固定点固定连接有内篷，内篷和多边拱形气柱外包覆有外篷，外篷底部连接有裙边，矩形气柱上分别设置有充气口和排气口；第二帐篷和第一帐篷结构相同；第一帐篷和第二帐篷对接位置处密封设置有第一柔性隔断门，第二帐篷内设置有第二柔性隔断门，第一帐篷内开设有核心工作间，第二帐篷内开设有缓冲间和样品接收间。本实用新型作业面积大，收拢后用10英尺标准集装箱运输，可快速抵达现场展开作业。