本实用新型提供了一种DNA提取试剂盒，包括盒体、固定在所述盒体外侧上端的试剂盖；其中，所述试剂盖上端中心设有一推拉盖；与所述推拉盖下表面接触的所述盒体的上端中部中心处设有一橡胶膜；所述盒体底端中心处设有一单向阀，所述盒体外表面底端可拆卸连接一底盖；所述盒体为包括内壁和外壁的双层结构，且所述内壁和所述外壁之间形成中空层，所述外壁上设有进液口与外界连通。本实用新型提供的DNA提取试剂盒，采用单向阀加硅胶塞的双通试剂盒设计，配合喷嘴使用，可以保证其在使用过程中全面密闭不与外界大气接触，杜绝外界粉尘微生物污染基因组的可能性；还借助喷嘴彻底清洗试剂盒，避免前次实验残留物污染本次实验的风险，其设计简单、使用方便。