本实用新型涉及生物安全技术领域，具体涉及双层采样手套；包括内部的套芯和外部的棉线层，棉线层套设在套芯外，套芯包括一体成型的第一手指部、第一手掌部、第一手背部和第一手腕部，棉线层包括一体成型的第二手指部、第二手掌部和第二手背部和第二手腕部，第一手腕部和第二手腕部处开设有手腕部开口处；本实用新型双层采样手套，采用双层设计，可以在采样时直接使用，内部不用再穿戴一层防止交叉污染的手套，节省人力和时间、提高了采样效率；设置有环状弹性细绳，防止采样过程中手套掉落；采用棉线织造，不影响手部的灵活性，采样的过程中仍然可以抓持物品。