本实用新型涉及医疗器械技术领域，公开了一种细菌检测采样装置，包括采样管和采样器，所述采样管包括管体和帽盖，管体内装有采样液，管体的顶部开口处设置有封口薄膜，帽盖盖合在管体顶部，并且其侧壁下部设置有与管体顶部外螺纹相配合的内螺纹，帽盖内还设置有一个用于刺破封口薄膜的尖刺部；所述采样器包括手柄和采样杆，手柄为空心圆管，其尾部设置有与管体顶部外螺纹相配合的内螺纹，采样杆通过手柄内设置的弹性部件与手柄连接，采样杆的侧壁上设置有定位部件，采样杆的端部设置有可拆卸的采样棉签。本实用新型结构简单，操作方便，并且在采样过程中不需要折断棉签杆即可防止手持部分进入试管内。