本实用新型公开了一种辣椒离体果实接种炭疽病抗性测定装置，包括保湿培养盒和盖合于保湿培养盒上的透光盖板，保湿培养盒上设有保湿水槽和至少一个培养区组件，培养区组件包括若干个培养分隔区，培养分隔区与保湿水槽相对应；透光盖板上对应培养分隔区设有接种孔组件，接种孔组件包括接种孔。本实用新型保湿培养盒内部具有固定针组件和保湿水槽，透光盖板上设有接种孔和若干个刻度圈，通过接种孔实现对辣椒果实接种炭疽病，并通过各个刻度圈能够快速测定出辣椒果实抗病级别；实现了辣椒果实的接种、培养、病害调查等一次性实验研究目的，同时接种位置、培养条件、病害调查标准均保持一致，减少了因人为操作而造成的抗性测定误差。