一种重组蛋白酶K的纯化方法及其应用
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摘要
本发明提供了一种重组蛋白酶K的纯化方法及其应用,该纯化方法采用超滤‑离子交换‑超滤工艺,具体包括:往重组蛋白酶K发酵液中加入缓冲液A,混匀后一次超滤获得已去除金属离子和分子量小于20KDa杂蛋白的超滤液;泵入用缓冲液A平衡的阳离子交换柱中,随后用缓冲液A复平衡后用缓冲液B洗脱,收集洗脱液;往洗脱液中加入缓冲液C,混匀后二次超滤,即可。本发明所提供的纯化方法仅采用简单的超滤‑离子交换‑超滤的纯化工艺可大大提高其生产规模,日产可达500g左右,其产品的SDS‑PAGE纯度、酶活性和比活性分别高于95%、800U/ml和40U/mg,且所用原料成本低廉,蛋白回收率高。
基本信息
专利标题 :
一种重组蛋白酶K的纯化方法及其应用
专利标题(英):
暂无
公开(公告)号 :
CN112831487A
申请号 :
CN202110112885.4
公开(公告)日 :
2021-05-25
申请日 :
2021-01-27
授权号 :
CN112831487B
授权日 :
2022-05-06
发明人 :
赵骞陈亮李晋王锋
申请人 :
武汉爱博泰克生物科技有限公司
申请人地址 :
湖北省武汉市东湖新技术开发区高新二路388号武汉光谷国际生物医药企业加速器1.1期7栋4层01室
代理机构 :
武汉蓝宝石专利代理事务所(特殊普通合伙)
代理人 :
刘璐
优先权 :
CN202110112885.4
主分类号 :
C12N9/50
IPC分类号 :
C12N9/50
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IPC结构图谱
C
C部——化学;冶金
C12
生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
C12N
微生物或酶;其组合物;繁殖、保藏或维持微生物;变异或遗传工程;培养基。
C12N9/00
酶,如连接酶;酶原;其组合物;制备、活化、抑制、分离或纯化酶的方法
C12N9/14
水解酶
C12N9/48
作用在肽键上,如促凝血酶、亮氨酸氨基肽酶
C12N9/50
蛋白酶
法律状态
2022-05-06 :
授权
2021-06-11 :
实质审查的生效
IPC(主分类) : C12N 9/50
申请日 : 20210127
申请日 : 20210127
2021-05-25 :
公开
注:本法律状态信息仅供参考,即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
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1、
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