本发明公开了一种三氟甲磺酰基炔酰胺类化合物及其制备方法和用途。基于该类炔酰胺与巯基的硫氢化反应，进而实现对多肽与蛋白质中的巯基进行选择性修饰与标记。该类化合物具有较好的稳定性。还可以选择性的只和巯基反应，而多肽或蛋白质上的其他活性基团不受影响；具有反应速率快、无副反应、反应条件简单温和、易操作、底物适用性广和原子经济性高等优点。其在酸碱、氧化条件下都具有良好的稳定性，并且可以在常温下稳定存在数月，为生物偶联、多肽和/或蛋白质中的巯基进行选择性修饰与标记提供了新的稳健途径。