本发明涉及小鼠耳蜗螺旋器的体外贴壁培养方法。本发明对贴壁用细胞外基质进行了筛选，获得适合小鼠耳蜗螺旋器贴壁的基质。采用鼠尾胶和多聚鸟氨酸作为基质包被，获得了更好的贴壁效果，可使得小鼠耳蜗螺旋器细胞存活至8天。并且，在贴壁培养的过程中，使用添加凝血酶敏感蛋白‑1（TSP‑1）的无血清培养基作为补料，可获得更佳的细胞贴壁培养效果，包含小鼠耳蜗螺旋器的基底膜在贴壁培养的第8天内外毛细胞仍然保持良好的形态，且培养至10天细胞仍然存活。